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應(yīng)用文章
霉?fàn)€水果還能吃嗎?展青霉素的檢測分析





前言

       近年來 ,關(guān)于食品或飼料中展青霉素超標(biāo)的事件時有報道。2017年8月,我國香港食品安全中心曾發(fā)布一批受展青霉素污染的瓶裝果汁飲品的食物警報,指出樣本中的展青霉素含量超標(biāo)。2020年5月,澳超市果汁疑遭受展青霉素污染!

       展青霉素又稱展青霉毒素、棒曲霉素、珊瑚青霉毒素,是一種具有極強(qiáng)毒性的真菌次級代謝產(chǎn)物,化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定, 耐高溫, 因此也易于在加工和儲存過程中存活。毒理學(xué)試驗(yàn)表明,展青霉素具有影響生育、致癌和免疫等毒理作用,同時也是一種神經(jīng)毒素。展青霉素具有致畸性,對人體的危害很大,導(dǎo)致呼吸和泌尿等系統(tǒng)的損害,使人神經(jīng)麻痹、肺水腫、腎功能衰竭。

       研究表明,在霉?fàn)€的杏、李、桃、梨、香蕉、菠蘿、青梅、蜜瓜、番茄、櫻桃、辣椒、葡萄、柿子等食品中均有發(fā)現(xiàn)展青霉素,但其主要存在于霉?fàn)€蘋果及其制品中,霉菌經(jīng)氣孔或表面?zhèn)谇秩胩O果表皮并在適合條件下繁殖,進(jìn)一步侵染到周圍的健康果肉組織。

       由國家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會國家食品藥品監(jiān)督管理總局發(fā)布了GB5009.185—2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中展青霉素的測定》,并將于2017年6月23日正式實(shí)施。



       本應(yīng)用介紹了賽里安儀器利用液相色譜法對展青霉素的定量定性分析,方法中使用了裝有C18反相色譜柱并配備超高靈敏度二極管陣列檢測器(DAD)的賽里安LC6000, 實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠,且線性良好,儀器運(yùn)行穩(wěn)定,靈敏度高。

實(shí)驗(yàn)部分

儀器

采用包含以下模塊的賽里安LC6000超高效液相色譜儀系統(tǒng):
● 集成六通道真空脫氣的賽里安 LC6100四元泵
● 賽里安 LC6210 高精度、低殘留自動進(jìn)樣器
● 賽里安 LC6320 立式柱溫箱
● 賽里安 LC6430 超高靈敏度二極管陣列檢測器


液相色譜條件
▼ 表1 方法參數(shù)

試劑及標(biāo)準(zhǔn)品
       乙腈中展青霉素(編號:90104a)、乙腈(HPLC級)

結(jié)果

示例圖譜
       展青霉素標(biāo)準(zhǔn)溶液出峰尖銳,詳見圖1。

 圖1  展青霉素示例色譜圖(200ng/ml)

標(biāo)準(zhǔn)曲線
       將展青霉素標(biāo)準(zhǔn)溶液依次稀釋為5、10、25、50、100、150、200ng/ml使用外標(biāo)法進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)定量 ,以濃度為橫坐標(biāo)峰面積為縱坐標(biāo)作外標(biāo)工作曲線 ;展青霉素響應(yīng)值和濃度呈良好的線性關(guān)系,所得到的相關(guān)系數(shù)為0.9993,詳見圖2。

 圖2  展青霉素標(biāo)準(zhǔn)曲線

重現(xiàn)性
       展青霉素峰面積RSD%=0.85(n=6),保留時間RSD%=0.05(n=6);結(jié)果見表2。


結(jié)論
       由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出,采用賽里安LC6000 UHPLC系統(tǒng),搭配SCION C18(250mm×4.6mm,5μm)色譜柱和DAD檢測器,可以實(shí)現(xiàn)對展青霉素素的檢測,靈敏度、穩(wěn)定性、線性均滿足需求。

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